Evaluación del diagnóstico de Ehrlichia canis mediante frotis sanguíneo y técnica molecular en perros de Costa Rica
Palabras clave:
Ehrlichia canis, frotis sanguíneo, PCR, perros, Costa RicaResumen
El objetivo de este trabajo fue comparar los resultados del diagnóstico de Ehrlichia canis, mediante frotis sanguíneo y técnica de reacción en cadena de la polimerasa, (PCR, Polymerase Chain Reaction, por sus siglas en inglés) en sangre de perros del Valle Central de Costa Rica. Para este fin, se utilizaron 300 muestras sanguíneas de caninos sospechosos de sufrir ehrliquiosis; estas muestras habían sido remitidas de diferentes clínicas veterinarias; también, habían sido analizadas, previamente, mediante frotis sanguíneo, PCR anidado, y en algunos casos, mediante técnica serológica. De cada muestra de sangre se obtuvo, además, información sobre: localización geográfica de la clínica veterinaria, datos del perro al que pertenecía la muestra sanguínea como: raza, edad, sexo y signos clínicos que presentó el perro. Del total de 300 muestras analizadas, en 147 (49,0%) hubo resultados positivos a E. canis, utilizando un PCR anidado; mientras que, en 178 (59,3%) fueron reportadas con inclusiones mediante la técnica de frotis sanguíneo. Solamente, en 103 (57,9%) de los casos positivos, en frotis sanguíneo, fue posible el diagnóstico molecular de E. canis; mientras que de las 122 muestras reportadas negativas (sin inclusiones) un 36,0% (44) de los casos resultaron positivas en la técnica de PCR. Para la prueba de frotis sanguíneo se determinó una sensibilidad del 70,1% y una especificidad del 51,0%, valor predictivo positivo de 57,9% y valor predictivo negativo de 63,9%, comparado con la técnica de PCR. El análisis de regresión logística reveló asociación positiva (p<0,05) con la presencia de inclusiones, pero no con la edad o el sexo del animal; mientras que, la aplicación de la prueba t-student detectó diferencias altamente significativas en los promedios de las variables de hematocrito y hemoglobina entre perros PCR positivos y perros PCR negativos a E. canis. De las 30 muestras evaluadas, previamente, mediante serología, un 25,0% de los casos seropositivos y un 36,4% de los casos seronegativos resultaron positivos en el diagnóstico molecular de E. canis. El hallazgo de valores bajos de hematocrito y hemoglobina, en combinación con signos clínicos y la detección de inclusiones en muestras sanguíneas, representan un fuerte indicio de infección con ehrliquiosis; sin embargo, es necesaria la aplicación de una técnica molecular como método diagnóstico confirmativo.
Referencias
Aguirre, E., A. Sainz, S. Dunner, I. Amusategui, L. López, F. Rodrígues-Franco, I. Luaces, O. Cortés, and M. A. Tesouro. 2004. First isolation and molecular characterization of Ehrlichia canis in Spain. Vet. Parasitol. 125:365-372.
Beaufils, J. P., J. Martin-Granel, and P. Jumelle. 1995. Diagnostic cytologique des ehrlichioses canines. Prat. Méd. Chir. Anim. Comp. 30:189-195.
Breitschwerdt, E. B., B. C. Hegarty, and S. I. Hancock. 1998. Sequential evaluation of dogs naturally infected with Ehrlichia canis, Ehrlichia chaffeensis, Ehrlichia equi, Ehrlichia ewingii, or Bartonella vinsonii. J. Clin. Microbiol. 36: 2645-2651.
Castro, M. B., R. Z. Machado, L. P. T. Aquino, A. C. Alessi, and M. T. Costa. 2004. Experimental acute canine monocytic ehrlichiosis: clinicopathological and immunopathological findings. Vet. Parasitol. 119:73-86.
Dagnone, A. S., H. S. de Morais, M. C. Vidotto, F. S. Jojima, and O. Vidotto. 2003. Ehrlichiosis in anemic, thrombocytopenic, or tick-infested dogs from a hospital population in South Brazil. Vet. Parasitol. 117:285-290.
Dawson, J. E., B. E. Anderson, D. B. Fishbein, J. L. Sanchez, C. S. Goldsmith, K. H. Wilson, and W. Duntley. 1991. Isolation and characterization of an Ehrlichia sp. from a patient diagnosed with human ehrlichiosis. J. Clin. Mirobiol. 29:2741-2745.
Dawson, J. E., K. L. Biggie, C. K. Warner, K. Cookson, S. Jenkins, J. F. Levine, and J. G. Olson. 1996. Polymerase chain reaction evidence of Ehrlichia chaffeensis, an etiologic agent of human ehrlichiosis, in dogs from southeast Virginia. Am. J. Vet. Res. 57:1175-1179.
Dumler, J. S., A. F. Barbet, C. P. Bekker, G. A. Dasch, G. H. Palmer, S. C. Ray, Y. Rikihisa, and F. R. Rurangirwa. 2001. Reorganization of genera in the families´ Rickettsiaceae and Anaplasmataceae in the order Rickettsiales:
unification of some species of Ehrlichia with Anaplasma, Cowdria with Ehrlichia and Ehrlichia with Neorickettsia, descriptions of six new species combinations and designation of Ehrlichia equi and ‘HE agent’ as subjective synonyms of Ehrlichia phagocytophila. Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 51:2145-2165.
Elias, E. 1991. Diagnosis of ehrlichiosis from the presence of inclusion bodies or morulae of E canis. J. Small. Anim. Pract. 33:540-543.
Felek, S., A. Unver, R. W. Stich, and Y. Rikihisa. 2001. Sensitive detection of Ehrlichia chaffeensis in cell culture, blood and tick specimens by reverse transcription-PCR. J. Clin. Microbiol. 39:460-463.
Harrus, S., T. Waner, I. Aizenberg, J. E. Foley, A. M. Poland, and H. Bark. 1998a. Amplification of ehrlichial DNA from dogs 34 months after infection with Ehrlichia canis. J. Clin. Microbiol. 36:73-76.
Harrus, S., T. Waner, I. Aizenberg, and H. Bark. 1998b. Therapeutic effect of doxycycline in experimental subclinical canine monocytic ehrlichiosis: Evaluation of a 6-week course. J. Clin. Microbiol. 36:2140-2142.
Harrus, S., T. Waner, H. Bark, F. Jongejan, and A. W. C. A. Cornelissen. 1999. Recent advances in determining the pathogenesis of canine monocytic ehrlichiosis. J. Clin. Microbiol. 37:2745-2749.
Harrus, S., M. Kenny, L. Miara, I. Aizenberg, T. Waner, and S. Shaw. 2004. Comparison of simultaneous splenic sample PCR with blood sample PCR for diagnosis and treatment of experimental Ehrlichia canis infection. Antimicrob. Ag. Chemother. 48:4488-4490.
Hori-Oshima, S., G. L. Tinoco, S. A. Barreras, M. Moro, and J. Viñasco. 2006. Detección de Ehrlichia canis mediante ELISA y PCR en perros de Mexicali, Baja California. En: VII Congreso Nacional de Parasitología Veterinaria. Set. 28 -30. Asociación Mexicana de Parasitólogos Veterinarios, A.C., México.
Iqbal, Z., W. Chaichanasiriwithaya, and Y. Rikihisa. 1994. Comparison of PCR with other tests for early diagnosis of canine ehrlichiosis. J. Clin. Microbiol. 32:1658-1662.
Keysary, A., T. Waner, M. Rosner, C. K. Warner, J. E. Dawson, R. Zass, K. L. Biggie, and S. Harrus. 1996. The first isolation, in vitro propagation, and genetic characterization of Ehrlichia canis in Israel. Vet. Parasitol. 62:331-340.
Kocan, A., G. Crowder Levesque, L. C. Whitworth, G. L. Murphy, S. A. Ewing , and R. W. Barker. 2000. Naturally ocurring Ehrlichia chaffeensis infection in coyotes from Oklahoma. Emerg. Infect. Dis. 6:477-480.
Lakshmanan, B., L. John, S. Gomathinayagam, and G. Dhinakarraj. 2007. Molecular detection of Ehrlichia canis from blood of naturally infected dogs in India. Vet. Archiv. 77:307-312.
Liddell, A. M., S. L. Stockham, M. A. Scott, J. W. Sumner, C. D. Paddock, M. Gaudreault-Keener, M. Q. Arens, and G. A. Storch. 2003. Predominance of Ehrlichia ewingii in Missouri dogs. J. Clin. Microbiol. 41:4617-4622.
Lockhart, J. M., W. R. Davidson, D. E. Stallknecht, J. E. Dawson, and E. W. Howerth. 1997. Isolation of Ehrlichia chaffeensis from wild white-tailed deer (Odocoileus virginianus) confirms their role as natural reservoir hosts. J. Clin. Microbiol. 35:1681-1686.
López, J., A. Castillo, M. Muñoz, and S. Hildebrandt. 1999. Hallazgo de Ehrlichia canis en Chile, informe preliminar. Arch. Med. Vet. 31:211-214.
Meneses, A. 1995. First report of canine ehrlichiosis in Costa Rica. Vet. Rec. 137:46-47.
Murphy, G. L., S. A. Ewing, L. C. Whitworth, J. C. Fox, and A. A. Kocan. 1998. A molecular and serologic survey of Ehrlichia canis, E. chaffeensis, and E. ewingii in dogs and ticks from Oklahoma. Vet. Parasitol. 79:325-339.
Mylonakis, M. E., A. F. Koutinas, C. Billinis, L. S. Leontides, V. Kontos, O. Papadopoulos, T. Rallis, and A. Fytianou. 2003. Evaluation of cytology in the diagnosis of acute canine monocytic ehrlichiosis (Ehrlichia canis): a comparison between five methods. Vet. Microbiol. 91:197-204.
Neer, T. M., E. B. Breitschwerdt, R. T. Greene, and M. R. Lappin. 2002. Consensus statement on ehrlichial disease of small animals from the infectious disease study group of the ACVIM. J. Vet. Intern. Med. 16:309-315.
Ndip, L.M., R. N. Ndip, S. N. Esemu, V. L. Dickmu, E. B. Fokam, D. H. Walker, and J. W. McBride. 2005. Ehrlichial infection in Cameroonian canines by Ehrlichia canis and Ehrlichia ewingii. Vet. Microbiol. 111:59-66.
Pérez, M., Y. Rikihisa, and B. Wen. 1996. Ehrlichia canis-like agent isolated from a man in Venezuela: antigenic and genetic characterization. J. Clin. Microbiol. 34:2133-2139.
Pérez, M., M. Bodor, C. Zhang, Q. Xiong, and Y. Rikihisa. 2006. Human infection with Ehrlichia canis accompanied by clinical signs in Venezuela. Ann. NY. Acad. Sci. 1078: 110-117.
Rímolo, M. 2006. Prevalencia serológica y citológica de la ehrlichiosis canina en Costa Rica. Tesis de grado. Universidad Nacional, Heredia, Costa Rica.
Rodríguez-Vivas, R. I., R. E. F. Albornoz, and G. M. E. Bolio. 2005. Ehrlichia canis in dogs in Yucatán, Mexico: seroprevalence, prevalence of infection and associated factors. Vet. Parasitol. 127:75-79.
Romero, L. E., A. I. Meneses, L. Salazar, M. Jiménez, J. J. Romero, D. M. Aguiar, M. B. Labruna, and G. Dolz. 2011. First isolation and molecular characterization of Ehrlichia canis in Costa Rica, Central America. Res. Vet. Sc. 91:95-97.
Sáinz, A., S. Delgado, I. Amusategui, M. A. Tesouro, and P. Cármenes. 1996. Seroprevalence of canine ehrlichiosis in Castilla-León (north–west Spain). Prev. Vet. Med. 29:1-7.
Standaert, S.M., T. Yu, M. A. Scott, J. E. Childs, C. D. Paddock, W. L. Nicholson, J. Singleton Jr, and M. J. Blaser. 2000. Primary isolation of Ehrlichia chaffeensis from patients with febrile illnesses: clinical and molecular characteristics. J. Infect. Dis. 181:1082-1088.
Waner, T. and S. Harrus. 2000. Canine monocytic ehrlichiosis. [en línea]. Consultado 16 Octubre del 2007. http://www.ivis.org.
Waner, T., S. Harrus, F. Jongejan, H. Bark, A. Keysary, and A. W. Cornelissen. 2001. Significance of serological testing for ehrlichial diseases in dogs with special emphasis on the diagnosis of canine monocyitic ehrlichiosis caused by Ehrlichia canis. Vet. Parasitol. 95:1-15.
Wen, B., Y. Rikihisa, J. M. Mott, R. Greene, H. Y. Kim, N. Zhi, G. C. Couto, A. Unver, and R. Bartsch. 1997. Comparison of nested PCR with inmunofluorescent-antibody assay for detection of Ehrlichia canis infection in dogs treated with doxycycline. J. Clin. Microbiol. 35:1852-1855.
Weiser, G.M., M. A. Thrall, R. Fulton, E. R. Beck, L. A. Wise, and J. L. Steenhouse. 1991. Granular Lymphocytosis and Hyperproteinemia in dogs with chronic ehrlichosis. J. Am. Anim. Hosp. Assoc. 27:84-88.
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